confocal microscopy는 laser를 광원으로, 시료로부터 대물렌즈(objective lens)를 통하여 광검출기(detector)에 이르는 빛의 경로 상에 pinhole을 설치하여 시료의 특정한 단면을 통과하는 빛, 즉 특정 단면의 영상만을 pinhole 로서 걸러냄으로써 기존의 형광현미경보다 개선된 해상도의 이미지를 얻을 수 있다. 현재 본 연구실에서는 confocal microscopy를 이용한 fixed-cell imaging 및 live-cell imaging을 다양한 연구분야에서 활용하고 있다.
immunological synapse의 formation 및 maturation 관찰
immune cell에서 특정 막단백질의 localization 관찰
immune cell의 activation에 따른 morphology 변화 관찰
TIRF(Total Internal Reflection Fluorescence) microscopy는 glass-water 또는 glass-buffer의 접촉면에 접촉된 시료의 제한된 범위를 관찰할 수 있는 관찰법이다. 빛이 굴절률이 다른 두 매질을 통과할 때 전반사(total reflection)가 일어남과 동시에 시료로 도달하는 감쇠파(evanescent wave)에 의해 접촉면으로부터 일정 범위 이내의 시료에 존재하는 형광이 excitation되는 원리 이다. 현재 본 연구실에서는 TIRF microscopy를 이용하여 immunological synapse의 경계면에서 immune cell이 activation되는 과정을 관찰하고 있다.
two-photon microscopy의 원리는 confocal microscopy와 비슷하나, 광원으로 파장이 길고 에너지가 낮은 두 개의 photon을 이용한다는 차이점이 있습니다. 그렇기 때문에 고화질의 동영상을 장시간에 걸쳐 얻을 수 있고, 손상되지 않은 조직 내부의 영상을 얻을 수 있다는 장점이 있다. 현재 본 연구실에서는 마우스의 생체 내에서 일어나는 면역반응을 two-photon microscopy를 이용하여 관찰하고있다.
